Anti-Nrf2 antibody [EP1808Y] - Carboxyterminal end (ab62352)

no signal in the nucleus

ANSWER:

J'ai reçu une réponse du laboratoire pour le ab62352. Effectivement, il à été décrit par des autres aussi, que protéine Nrf2 peux migrer à 100kD. Voici un extrait d'un article (http://cancerres.aacrjournals.org/content/67/2/546.full): "It should be noted that the Nrf2 band seemed at ∼100 kDa, although the expected MW is at 68 kDa. The occurrence of the higher molecular mass of Nrf2 in Western blot analysis has been described by others and is suggested to represent a Nrf2-actin complex." Le laboratoire n'a pas testé cet anticorps sur des fractions cellulaires. Les tests sont tous sur des lysats cellulaires totaux. Par contre nous pouvons confirmer que l'immunogène de cet anticorps ne contient pas des résidus qui pourraient être phosphorylés. J'espère que ces informations vous sont utiles. Comme discuté au téléphone, nous aimerions investiguer en plus détail le problème que vous avez avec le ab62352. Veuillez pour ceci s'il vous plaît nous transmettre les détails expérimentales avec une image du résultat. Je vous ai mis en document attaché encore un fois le questionnaire qui permets de regrouper facilement cette information. Si nous arrivons pas à résoudre ce problème, nous allons remplacer ce tube pour vous en accord avec notre garantie. Je me réjouis de recevoir ces détails de votre part. Veuillez ne pas hésiter à me contacter aussi si vous avez des questions.

No signal in the nucleus in WB after stimulation of primary human fibroblast. Signal ok in total extracts.

ANSWER:

Je suis désolée d'apprendre que le nouveau tube de l'ab62352  ne vous donne pas le résultats attendus. Veuillez trouver ci-joint le questionnaire que nous avons discuté au téléphone qui nous permet de regrouper le plus d'informations possible sur le protocole que vous avez utilisé avec cet anticorps. Veuillez nous le renvoyer avec les images des résultats avec les anticorps ab62352. Merci de votre coopération. Si nous concluons que notre produit est fautif et ne fonctionne pas comme explicité par notre fiche technique, nous serons ravis de mettre en place l'envoi d'un tube de remplacement gratuit ou d'un remboursement (sous réserve d'une commande ultérieure de 180 jours). Je vous remercie par avance de nous envoyer votre protocole.  

WB with human cell lysate sees very strong band at 15 kDa (in siRNA-treated and untreated samples) very faint band 68 kDa is knocked down with siRNA (expected MW)

Ab: 1/1500 block with Odyssee/Licor blocking solution secondary: OK, works well with other primaries

ANSWER:

Thank you for confirming these details and for your cooperation. The details provided enable us to closely monitor the quality of our products.

I am sorry this product did not perform as stated on the datasheet and for the inconvenience this has caused. As requested, I have issued a free of charge replacement with the order number xxx with ab53019.

To check the status of the order please contact our Customer Service team and reference this number.

Please note that this free of charge replacement vial is also covered by our Abpromise guarantee. Should you still be experiencing difficulties, or if you have any further questions, please do not hesitate to let us know.

I wish you the best of luck with your research.

Hi, Can you tell me if both antibodies are staining the protein in the cytoplasm and in the nucleus? I am afraid they have another conformation after translocation? anti-heme oxygenase ab13248 - anti-Nrf2  ab62352 -

thanks in advance

ANSWER:

Thank you for contacting Abcam about ab13248 and ab62352.

The antibody, anti-heme oxygenase (ab13248), recognizes a protein that is found in both the cyotplasm and nucleus, depending on the cell type that you are using.  I have included a link to a reference that will provide more details:

http://www.nature.com/bjc/journal/v97/n12/full/6604081a.html

The anti-Nrf2 (ab62352) antibody, will recognize a protein that is cytosolic under unstressed conditions but translocates into the nucleus upon induction by electrophilic agents.

If there is anything else I can do to help, please let me know.