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Anti-Von Willebrand Factor antibody [4F9] (ab20435)

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3 questions for ab20435

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Question 1

Friday 20-April-2012

suche AK gegen VWF gegen D3-Domaene (=Bdgsstelle fuer Factor VIII; d.h. zum Blocken der Bdg). ELISA/Biacore, human

ANSWER:

 

Vielen Dank für Ihren Anruf.

Nachdem ich wie versprochen alle unsere Von Willebrand Faktor- Antikörperdaraufhin untersucht habe, ob sie möglicherweise die Bindung von Faktor VIII inhibieren können, weiß ich nicht, ob ich wirklich gute Nachrichten für Sie habe:

Von denen, die gegen eine bestimmte Sequenz von vWF gerichtet sind, wären eventuell ab96340 oder ab93708 die aussichtsreichsten Kandidaten. Die Immunogene liegen zwischen Aminosäuren 1100 und 1200, was noch am nächsten an der D3-Domäne (Aminosäuren 856-1011/1074) gelegen ist. Ob dies allerdings für die Inhibition der Bindung ausreicht, ist nicht geklärt und müsste getestet werden.

ab96340: http://www.abcam.com/index.html?datasheet=96340 (or use the following: http://www.abcam.com/index.html?datasheet=96340).

ab93708: http://www.abcam.com/index.html?datasheet=93708 (or use the following: http://www.abcam.com/index.html?datasheet=93708).

(Folgende Antikörper sind gegen weiter entfernte Regionen gerichtet, und sind daher wohl nicht geeignet: ab47160, ab47129, ab47139, ab47151, ab49706)

Daneben haben wir noch einige Antikörper, die gegen das Volllängenprotein generiert wurden. Da ein Epitopmapping routinemäβig nicht durchgeführt wird, kann man nur experimentell bestimmen, wo das/die Epitope liegen bzw. ob eine Faktor VIII-Bindung inhibiert werden kann. Hier würde ich empfehlen, Antikörper zu testen, die wir für die Anwendung im ELISA garantieren können:

ab11713: http://www.abcam.com/index.html?datasheet=11713 (or use the following: http://www.abcam.com/index.html?datasheet=11713).

ab68545: http://www.abcam.com/index.html?datasheet=68545 (or use the following: http://www.abcam.com/index.html?datasheet=68545).

ab115771: http://www.abcam.com/index.html?datasheet=115771 (or use the following: http://www.abcam.com/index.html?datasheet=115771).

ab61292:http://www.abcam.com/index.html?datasheet=61292 (or use the following: http://www.abcam.com/index.html?datasheet=61292).

Bei allen anderen wäre es reine Spekulation, ob Sie im ELISA funktionieren UND die Bindung blockieren.

Falls Sie trotz all dieser Unwägbarkeiten einen dieser Antikörper in Ihren Versuchen testen möchten, kann ich Ihnenden beim letzten Mal erwähnten Testrabatt anbieten. Die Bedingungen zu unserem 100% Abreview Rabatt können Sie unter dem folgenden Link noch einmal nachlesen: http://www.abcam.com/collaborationdiscount

Ich hoffe, diese Informationen helfen Ihnen weiter. Falls Sie einen Rabattcode erhalten möchten oder weitere Fragen haben, zögern Sie bitte nicht, sich wieder an mich zu wenden.

Question 2

Friday 30-September-2011

Bonsoir,

Pouvez-vous me renseigner sur le vWF anti humain ab20435 à propos de son application en cytométrie

Faut-il pour l’utiliser perméabiliser la membrane des cellules endothéliales ?

Avez-vous un protocole associé ?

Merci de bien vouloir m’apporter votre réponse

Cordialement

 

ANSWER:

 

Merci de nous avoir contactés.

Le laboratoire m'a informé que l'anticorps ab20435 a été utilisé en cytométrie en flux sur cellules Jurkat et thrombocytes.

- Cellules Jurkat : fixation avec 1% formaldéhyde et perméabilisation avec une solution contenant de la saponine.

- Thrombocytes : fixation avec 1% formaldéhyde, rinçage et suspension dans du PBS sans perméabilisation.

J'espère que ces informations vous seront utiles. N'hésitez pas à nous contacter de nouveau si vous avez d'autres questions.

Question 3

Thursday 10-August-2006

When this product was tested for flow cytometry, was it tested on HUVECs collected using trypsin? Was a permeabilization step performed prior to staining? Finally, did FITC and PE secondary antibodies work equally well with this primary antibody. Any information available will be helpful.

ANSWER:

 

Thank you for your enqiry regarding the FACS testing of this antibody (ab20435). The flow cytometry application for this antibody is in a published reference. The full text is available free on-line at

http://www.bloodjournal.org/cgi/reprint/91/2/491.pdf

The sample preparation and flow cytometry protocol used can be found in the Materials and Methods on Page 492. Testing in this procedure was done after FITC-labeling of the antibody.

I hope this helps! Please don't hesitate to get in touch again if you have any more questions.

With thanks

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Please note: All products are "FOR RESEARCH USE ONLY AND ARE NOT INTENDED FOR DIAGNOSTIC OR THERAPEUTIC USE"