Question (43968) | Anti-c-Myb (phospho S11) antibody [EP769Y] (ab45150)

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Question

danke für Ihre schnelle Antwort.

Ich habe verschiedene Lysate aus humanen, monozytären Zelllinien verwendet. Zum einen Ganzzellextrakte, wobei die Zellen mit Triton X 100 1% in PBS mit oder ohne Ultraschall lysiert wurden. Zum anderen habe ich Kernextrakte dieser Zellen eingesetzt, die ich mit dem Active Motif Kit generiert habe. Proteaseinhibitoren habe ich jeweils immer zugesetzt.

Vor dem Beladen habe ich die Proben jeweils in Mercaptoethanol-haltigem Ladepuffer gekocht.

Der von mir getestete Antikörper wurde im mm 2011 von uns bestellt- da ich einiges versucht habe und nebenbei noch andere Projekte laufen, also schon vor etwas mehr als einem halben Jahr.

Answer

Vielen Dank für Ihre Antwort und für diese weiteren Informationen.

Die Protokolldetails bestätigen meine Vermutung, dass der anti-Myb-Antikörper wohl leider fehlerhaft ist. Zwar ist die Lyse mit Ultraschall vielleicht etwas harsch und kann nach unserer Erfahrung unter Umständen zu unerwünschten Banden führen; allerdings haben Sie ja auch verschiedene Extraktionen ausprobiert, daher ist dieser Punkt sicher nicht der Knackpunkt.

Es tut mir leid, dass ab45150nicht wie erwartet funktioniert hat. Ich weiß, dass Sie viel Zeit für diese Experimente verwendet haben und möchte Ihnen daher einen kostenlosen Ersatz oder eine Gutschrift anbieten (im Einzelfall können wir die Garantiezeit ausdehnen, und in Ihrem Fall ist diese Ausnahme absolut berechtigt!). Wenn Sie möchten, kann ich Ihnen gerne ein neues Lot von ab45150 zusenden, oder alternativ jeden anderen primären Antikörper Ihrer Wahl. Ich stelle Ihnen auch gerne eine Gutschrift aus, falls Ihnen dies im Moment besser passt.

Um dies zu arrangieren, benötige ich die ursprüngliche Bestellung. Können Sie dazu mir folgendes bestätigen: Bestellnummer x?

Vielen Dank für Ihre Kooperation und Hilfsbereitschaft. Ich freue mich auf Ihre Antwort.