Overview

  • Product name
    Anti-CD3 antibody [RM0027-3B19]
    See all CD3 primary antibodies
  • Description
    Rat monoclonal [RM0027-3B19] to CD3
  • Host species
    Rat
  • Tested applications
    Suitable for: IP, Flow Cyt, ICC/IF, IHC-Pmore details
  • Species reactivity
    Reacts with: Mouse
  • Immunogen

    Mouse CD3 positive cells

  • Positive control
    • Spleen tissue

Properties

Applications

Our Abpromise guarantee covers the use of ab56313 in the following tested applications.

The application notes include recommended starting dilutions; optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

Application Abreviews Notes
IP 1/100.
Flow Cyt 1/100 - 1/500.

ab18536 - Rat monoclonal IgG2b, is suitable for use as an isotype control with this antibody.

ICC/IF Use at an assay dependent concentration. PubMed: 23264346
IHC-P 1/50 - 1/400.

Target

  • Function
    The CD3 complex mediates signal transduction.
  • Involvement in disease
    Defects in CD3D are a cause of severe combined immunodeficiency autosomal recessive T-cell-negative/B-cell-positive/NK-cell-positive (T(-)/B(+)/NK(+) SCID) [MIM:608971]. A form of severe combined immunodeficiency (SCID), a genetically and clinically heterogeneous group of rare congenital disorders characterized by impairment of both humoral and cell-mediated immunity, leukopenia, and low or absent antibody levels. Patients present in infancy recurrent, persistent infections by opportunistic organisms. The common characteristic of all types of SCID is absence of T-cell-mediated cellular immunity due to a defect in T-cell development.
  • Sequence similarities
    Contains 1 ITAM domain.
  • Cellular localization
    Membrane.
  • Information by UniProt
  • Database links
  • Alternative names
    • 4930549J05Rik antibody
    • A430104F18Rik antibody
    • AW552088 antibody
    • Cd247 antibody
    • CD247 antigen antibody
    • CD247 antigen, zeta subunit antibody
    • CD247 molecule antibody
    • CD3 antibody
    • CD3 antigen, delta subunit antibody
    • CD3 delta antibody
    • CD3 epsilon antibody
    • CD3 eta antibody
    • CD3 gamma antibody
    • CD3 molecule delta polypeptide antibody
    • CD3 molecule, epsilon polypeptide antibody
    • CD3 molecule, gamma polypeptide antibody
    • CD3 zeta antibody
    • CD3-DELTA antibody
    • CD3d antibody
    • CD3D antigen delta polypeptide antibody
    • CD3d antigen, delta polypeptide (TiT3 complex) antibody
    • CD3d molecule delta antibody
    • CD3d molecule delta CD3 TCR complex antibody
    • CD3d molecule, delta (CD3-TCR complex) antibody
    • CD3D_HUMAN antibody
    • CD3E antibody
    • CD3e antigen antibody
    • CD3E antigen epsilon polypeptide antibody
    • CD3e antigen, epsilon polypeptide (TiT3 complex) antibody
    • CD3e molecule epsilon antibody
    • CD3e molecule epsilon CD3 TCR complex antibody
    • CD3e molecule, epsilon (CD3-TCR complex) antibody
    • CD3epsilon antibody
    • CD3G antibody
    • CD3g antigen antibody
    • CD3G antigen gamma polypeptide antibody
    • CD3g antigen, gamma polypeptide (TiT3 complex) antibody
    • CD3g molecule gamma antibody
    • CD3g molecule gamma CD3 TCR complex antibody
    • CD3g molecule, gamma (CD3-TCR complex) antibody
    • CD3H antibody
    • CD3Q antibody
    • CD3Z antibody
    • CD3zeta antibody
    • Ctg3 antibody
    • FLJ17620 antibody
    • FLJ17664 antibody
    • FLJ18683 antibody
    • FLJ79544 antibody
    • FLJ94613 antibody
    • IMD19 antibody
    • Leu-4 antibody
    • MGC138597 antibody
    • OKT3, delta chain antibody
    • OTTHUMP00000032544 antibody
    • T cell receptor antibody
    • T cell receptor T3 delta chain antibody
    • T cell receptor T3 gamma chain antibody
    • T cell receptor T3 zeta chain antibody
    • T cell receptor zeta chain antibody
    • T cell surface glycoprotein CD3 antibody
    • T cell surface glycoprotein CD3 delta chain antibody
    • T cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain antibody
    • T cell surface glycoprotein CD3 gamma chain antibody
    • T cell surface glycoprotein CD3 zeta chain antibody
    • T-cell antigen receptor complex, delta subunit of T3 antibody
    • T-cell antigen receptor complex, epsilon subunit of T3 antibody
    • T-cell antigen receptor complex, gamma subunit of T3 antibody
    • T-cell antigen receptor complex, zeta subunit of CD3 antibody
    • T-cell receptor T3 delta chain antibody
    • T-cell receptor T3 gamma chain antibody
    • T-cell surface antigen T3/Leu-4 epsilon chain antibody
    • T-cell surface glycoprotein CD3 delta chain antibody
    • T-cell surface glycoprotein CD3 gamma chain antibody
    • T3 antibody
    • T3d antibody
    • T3e antibody
    • T3g antibody
    • T3z antibody
    • TCRE antibody
    • TCRk antibody
    • Tcrz antibody
    • TCRzeta antibody
    see all

Images

  • ab56313, staining Mouse CD3 in Kidney, using Immunohistochemistry, Paraffin embedded tissue.
  • ab56313 at 1/400 dilution staining CD3 in LPS treated mouse spleen sections by immunohistochemistry (Formalin/ PFA fixed paraffin-embedded tissue sections). 

References

This product has been referenced in:
  • Larasati YA  et al. Curcumin targets multiple enzymes involved in the ROS metabolic pathway to suppress tumor cell growth. Sci Rep 8:2039 (2018). IHC-P . Read more (PubMed: 29391517) »
  • Guo Y  et al. Tim-3 exacerbates kidney ischaemia/reperfusion injury through the TLR-4/NF-?B signalling pathway and an NLR-C4 inflammasome activation. Clin Exp Immunol 193:113-129 (2018). Read more (PubMed: 29570768) »
See all 8 Publications for this product

Customer reviews and Q&As

1-5 of 5 Abreviews or Q&A

Answer

Merci pour cesprécisions.

Nous sommes désolés que le produit ab56313 que vous avez reçu ne fonctionne pas comme attendu. Ce produit est actuellement étudié,retesté et recaractérisédansle butdemaintenir un hautniveau contrôle qualité.
Comme convenu j'ai mis en place l'envoi d'une unité gratuite d'anti-CD3 ab5690 en remplacement du ab56313. Le numéro de commande est ****. Vous recevrez prochainement un mail de confirmation comprenant les détails d'expédition.

N'hésitez pas à nous contacter lors d'une prochaine occasion.

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Question

Nous avons commandé récemment l'anticorps suivant :
Anti-CD3 antibody [RM0027-3B19] (ab56313) Rat monoclonal
Pour pouvoir faire des marquages immunohistochimiques sur prélèvements murins FFPE (formalin fixed, paraffin embedded).
Malheureusement, et après plusieurs essais infructueux, nous avons la certitude que cet anticorps n'est pas fonctionnel.

Nous avons réalisé des marquages sur coupes de rate et d'intestin grêle de souris, avec un contrôle positif en parallèle (Rat anti-mouse F4/80 Serotec, permettant d'utiliser le même système de révélation secondaire) qui nous a donné entière satisfaction.

Nous avons commencé par utiliser les conditions recommandées par votre fiche technique (antigen retrieval : proteinase K 20 µg/mL 15 min @ RT ; AcI 1/20eme ; révélation avec kit Vector ABC elite anti Rat IgG permettant d'amplifier drastiquement le signal) sans résultat.
Nous avons essayé de faire varier les conditions de démasquage (40 µg/mL proteinase K ; antigen retrieval avec Tp Citrate pH 6.0 ; TE pH 9.0 ; 10 à 30 minutes), ou le système de révélation (anticorps secondaires anti-rat DyLight 549) avec à chaque fois le même résultats : pas de marquage spécifique.

En fait, sur les coupes traitées avec votre anticorps (mais pas sur un contrôle négatif en parallèle sans anticorps primaire) on peut voir systématiquement de petites traces de marquage ponctuel amorphes et très intense (sans noyau, et à localisation aléatoire dans les tissus testés, il ne s'agit clairement pas de CD3) qui nous font penser à un marquage aspécifique/précipité lié à une dénaturation de l'anticorps. A réception, l'anticorps a toutefois été immédiatement aliquoté et stocké à -20°C. Je peux bien évidement vous fournir des images des résultats obtenus.

Nous avons perdu pas mal de temps avec cet anticorps. C'est toutefois la première fois que j'ai un tel problème avec l'un de vos anticorps. Le lot réceptionné est le suivant : GR53072-3.

Pouvez-vous nous confirmer que vous avez testé avec succès ce lot pour IHC-P ? Ce lot aurait-il pu être détérioré avant réception ? Quelle solution rapide pouvez-vous nous apporter ? Nous avons besoin rapidement de pouvoir détecter du CD3 murin sur coupes IHC-P.

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Answer

Merci de nous avoir contactés et merci beaucoup pour les détails de votre protocole. Ces informations sont très importantes pour nous car elles nous permettent de rechercher la source du problème rencontré avec cet anticorps et de prendre les dispositions nécessaires pour assurer une bonne qualité de nos produits.

Nous sommes désolés que le produit ab56313 que vous avez reçu ne fonctionne pas comme attendu.

Le seul lot actuellement en stock est celui que vous avez reçu (GR53072). Préférez-vous recevoir unautre anti-CD3tel que :
- le polyclonal de lapin ab5690 : https://www.abcam.com/ab5690
-lemonoclonal de lapin ab16669 : https://www.abcam.com/ab16669
-le polyclonal de lapin ab16044 : https://www.abcam.com/ab16044
-ou un autreanti-CD3.Le lien vers la liste complète des 7 anti-CD3 testé en IHC-P et chez la souris est : https://www.abcam.com/index.html?pageconfig=searchresults&search=CD3&pt=1&sk=react&sv=2&sn=Mouse&l=3&fViewMore=1

Je peux égalementéditer un avoir ou un remboursement contre la commande originale.

Merci de m'indiquer la résolution qui vous conviendrait le mieux.

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Question
Answer

Thank you for your inquiry.


Please find the recommended IHC protocol below:


1. Dewax and Rehydration: Place the slides in a rack and sequentially pass the rack through following solutions: Histoclear or Xylene twice, 10 minutes each; and then a graded series of 100%, 90%, 70%, and 50% ethanol, 2 minutes each.


2. Wash the slides with tap water for 5 minutes and once with DI water.


3. Antigen Retrieval: treat the sections with 20ug/ml proteinase K in PBS for 15-25 minutes at room temperature.


4. Wash the slides with tap water for 5 minutes and quench the endogenous peroxidase with 3% H2O2 in DI water for 30 minutes


5. Wash the slides with tap water for 5mins and soaking in PBS-Tween20 (0.1%)


6. Block the slides with blocking buffer (25%bovine serum in PBS-Tween20) for at least 10minutes


7. Then incubate the specimen with primary antibody (ab56313, dissolved with 200ul PBS) at 1:25-100 dilutions overnight at 4 degree (or room temperature if the signal is too weak).


8. Wash the slides with rotation in PBS-Tween20 for 3 times, 5 minutes each.


9. Incubate the specimen with rabbit-anti rat secondary antibody for 30minutes at room temperature.


10. Wash the slides with rotation in PBS-Tween 20 for 3 times, 5 minutes each.


11. Incubate the specimen with Polymer-HRP labeled anti rabbit for 30 minutes at room temperature.


12. Wash the slides with rotation in PBS-Tween20 for 3 times, 5 minutes each.


13. Perform DAB Color development.


14. Wash with tap water and count stain the nuclear with hematoxylin.


Note: 1) If you use buffered formalin fixatives, we recommend that fixation should be done no longer than overnight (4

degree preferred). 2) This protocol is for reference only and the final condition should be optimized by the end user.


I hope this information halps. Please contact us with any other questions.

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Answer

Thank you for your reply.

I am sorry that this antibody did not perform as stated on the datasheet. If payment has already been made on the original order and you wish to receive a refund, please ask your purchasing department to contact our accounting department so that we may gather the correct information needed for the refund. To avoid confusion, please ensure your accounts department is aware of how the credit note is being used.

Our accounting department can be contacted by email at us.credits@abcam.com or by telephone using the information at the Contact Us link in the top right corner of our website. Please refer to the credit note ID in any correspondence with our accounting department.

The credit note ID is for your reference only and does not automatically guarantee the credit.

I hope this experience will not prevent you from purchasing other products from us in the future. Our Scientific Support team is always at your service, should you require further expert advice.

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Application
Immunohistochemistry (Formalin/PFA-fixed paraffin-embedded sections)
Sample
Mouse Tissue sections (Spleen)
Specification
Spleen
Fixative
Formaldehyde
Antigen retrieval step
Heat mediated - Buffer/Enzyme Used: Dako S2375 High pH HIER
Permeabilization
No

Abcam user community

Verified customer

Submitted May 11 2010

Please note: All products are "FOR RESEARCH USE ONLY AND ARE NOT INTENDED FOR DIAGNOSTIC OR THERAPEUTIC USE"

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