Question (24529) | Anti-Collagen IV antibody (ab19808)

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Question

no signal on mouse dental tissue where Coll IV is expressed. secondary antibody ok, as with other rabbit antibody against laminin works well. dilutions 1/500, 1/200 and 1/100. Incubation 1h at RT, blocking BSA 1%, no antigen retrieval.

Answer

Merci pour nous avoir contacté. Je suis désolée que vous avez des problèmes avec un de nos anticorps. Comme discuté, j'ai donc contacté le laboratoire pour avoir plus d'information sur le protocole et le démasquage utilisé avec cet anticorps. En effet, le laboratoire nous à confirmé que les techniques de démasquage à la chaleur sont en générale trop dure pour des études de collagène. Effectivement, celles-ci peuvent induire une altération de la membrane ainsi que une disruption ou encore un bruit de fond élevé. Je vous ai donc mis en document attaché le protocole du laboratoire, qui lui utilise quand même un démasquage mais avec de la glycine et de hyaluronidasse. J'espère que ceci est utile pour vous. Est-ce que vous avez la possibilité d'essayer un traitement enzymatique des lames? Je pense que ceci pourrait être une solution. Je me réjouis d'avoir de vos nouvelles. N'hésitez à me contacter aussi si vous avez des questions.

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