Donkey Anti-Rabbit IgG H&L (6nm Gold) preadsorbed (ab105294)

Fixation precedes incubation with primary and secondary antibodies.

The protocol for gold-antibody complexes is essentially the same as for all conjugates with the exception of the buffer used to dilute and wash.


Step 1: Block with 5% normal serum from the host species of the gold-secondary antibody diluted in PBS.

Step 2: Wash with PBS-BSA.

In each step the grid is floated on a drop of solution.



Control: Step 3: Incubate directly with the secondary antibody without addition of the primary antibody.


Step 4: Wash with PBS-BSA.

This control experiment will tell you if the secondary is giving background. If it is not giving background but there is background in the full experiment, you know that any background is coming from the primary.



Full Experiment: Step 3: Incubate with the primary antibody diluted in PBS-BSA.

Step 4: Wash with PBS-BSA.

Step 5: Incubate with the gold labeled secondary antibody.

Step 6: Wash with PBS-BSA

Vielen Dank für Ihren Anruf.

Wie versprochen, habe ich das Labor wegen der genauen Konzentration von ab105294 kontaktiert, und habe erfahren, dass die genaue Konzentration leider nicht bestimmt werden kann. Zwar wird der Antikörper vor der Konjugation mit den Goldkomplexen aufgereinigt. Die exakte Konzentration lässt sich jedoch nicht bestimmen, weil nach der Konjugation Monomere von Multimeren über eine Dichtegradientenzentrifugation abgetrennt werden. Diese Monomere werden vor und nach der Zentrifugation mit Albumin stabilisiert, und leider gibt es keine verlässliche Methode, die Konzentration des Antikörpers in dieser Präparation zu bestimmen.

Nach unserer Erfahrung zeigt dieser sekundäre Antikörper in der EM in Verdünnungen von 1:10 bis 1:100 gute Ergebnisse, so dass wir hoffen, diese Angaben können Ihnen für Ihre Experimente als Anhaltspunkt dienen.

Ich möchte mich dafür entschuldigen, dass ich nicht mehr Informationen für Sie habe und hoffe, dass diese Angabe dennoch hilfreich für Sie ist. Bitte zögern Sie nicht, sich wieder bei uns zu melden, falls Sie weitere Fragen haben.