Donkey Anti-Sheep IgG H&L (DyLight® 650) (ab96942)

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Overview

  • Product name

    Donkey Anti-Sheep IgG H&L (DyLight® 650)
    See all IgG secondary antibodies

  • Description

    Donkey polyclonal Secondary Antibody to Sheep IgG - H&L (DyLight® 650)

  • Host species

    Donkey

  • Target species

    Sheep

  • Specificity

    By immunoelectrophoresis and ELISA this antibody reacts specifically with Sheep IgG and with light chains common to other Sheep immunoglobulins. No antibody was detected against non immunoglobulin serum proteins.

  • Tested applications

    Suitable for: Flow Cyt, IHC-P, ICC/IFmore details

  • Conjugation

    DyLight® 650. Ex: 654nm, Em: 673nm

Properties

  • Form

    Liquid

  • Storage instructions

    Shipped at 4°C. Store at +4°C.

  • Storage buffer

    Preservative: 0.09% Sodium azide
    Constituents: 0.2% BSA, PBS
  • Concentration information loading...

  • Purity

    Immunogen affinity purified

  • Purification notes

    This antibody was isolated by affinity chromatography using antigen coupled to agarose beads and conjugated to DyLight® 650.

  • Clonality

    Polyclonal

  • Isotype

    IgG

  • General notes

    DyLight® 650 replaces DyLight® 649.

  • Research areas

Applications

Our Abpromise guarantee covers the use of ab96942 in the following tested applications.

The application notes include recommended starting dilutions; optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

Application Abreviews Notes
Flow Cyt 1/50 - 1/200.
IHC-P 1/50 - 1/500.

DyLight® 650 replaces DyLight® 649. The DyLight® 650 excitation is 652nm and the emission is 672nm. DyLight® 650 hence provides the same far-red fluorescence and photostability as the DyLight® 649 dye. Please refer to the vial in order to check whether the product you received is DyLight® 649 or DyLight® 650. This information however will have no impact on your experiments. For more information please refer to DyLight® 650.
ICC/IF 1/50 - 1/500.

Images

  • Immunocytochemistry/ Immunofluorescence - Donkey Anti-Sheep IgG H&L (DyLight® 650) (ab96942)
    Immunocytochemistry/ Immunofluorescence - Donkey Anti-Sheep IgG H&L (DyLight® 650) (ab96942)This image is courtesy of an Abreview submitted by Marcella Flores.

    ab62116 staining MAP1LC3A in mouse splinocytes by ICC/IF (Immunocytochemistry/immunofluorescence). Cells were fixed with paraformaldehyde, permeabilized with Triton X-100 1% and blocked with 2% serum for 1 hour at 25°C. Samples were incubated with primary antibody (1 µg/ml in PBS/2% FBS) for 24 hour at 4°C. A DyLight® 650-conjugated donkey anti-sheep IgG H&L (ab96942) (1/1000) was used as the secondary antibody.

  • Donkey Anti-Sheep IgG H&L (DyLight® 650) (ab96942)
    Donkey Anti-Sheep IgG H&L (DyLight® 650) (ab96942)

    Emission spectra of DyLight® fluorochromes available in our catalog.
    Line colors represent the approximate visible colors of the wavelength maxima.

References

This product has been referenced in:

  • Esch MB  et al. Multi-cellular 3D human primary liver cell culture elevates metabolic activity under fluidic flow. Lab Chip 15:2269-77 (2015). Read more (PubMed: 25857666) »
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Customer reviews and Q&As

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1-3 of 3 Abreviews or Q&A

Question

Bonjour
l'anticorps produit chez la chèvre: le ab6564 est un chèvre anti rabbit couplé Cy5 et préabsorbé contre la chèvre et le cochon d’Inde.corespond a nos besoins


merci
cordialement

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Answer

Merci de nous avoir contactés.

Je suis heureuse de vous confirmer la mise en place de l'envoie d'une unité gratuite de l'ab6564. Je me permets de vous transférer le numéro de commande de ceci :1064663 . Vous recevrez prochainement un mail de confirmation comprenant les détails d'expédition.
Je vous serais reconnaissante si vous pourriez nous donner un feedback sur la performance de cet anticorps, avec un image et une légende, que nous pourrions ajouter sur notre fiche technique.
Je vous souhaite bon succès avec votre recherche.

N'hésitez pas à nous contacter lors d'une prochaine occasion.

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Question

Bonjour
Pardonnez moi pour le temps de réponse. nous avons dut nous réunir pour réétudier notre approche pour ces marquages suite à ces informations.
En fait, le plus gros problème que nous avons, c’est que l’anticorps secondaire anti sheep reconnait le goat et le guinea pig . Nous avons un marquage sans la présence du primaire donc c’est le ab96942 qui n’ai pas absorbé?
Aux vu des ces difficultés nous allons marquer C-Fos en rouge (anti C-fos rabbit que nous avons ) et les double marquage avec alexa 488
Donc nous aurions besoin d’un Donkey anti rabbit Cy5 ou Dy650 qui ne croise pas avec la souris, le rat , le poulet et si possible le cochon d’inde.
Si vous avez des suggestions n’hésitez pas

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Answer

Merci de votre réponse.

Effectivement, c’est le ab96942 qui n’est pas préabsorbé. Je suis désolée que j’ai confondue les numéros de catalogue.

Nous avons un anticorps qui pourrait être idéale pour vous, mais qui est un anticorps produitchez lachèvre: le ab6564 est un chèvre anti rabbit couplé Cy5 et préabsorbé contre la chèvre et le cochon d’Inde. https://www.abcam.com/index.html?datasheet=6564 (or use the following: https://www.abcam.com/index.html?datasheet=6564).

En DyLight 550 nous avons deux anticorps, le donkey anti rabbit ab96920 et legoat antirabbitab96900 qui sont préabsorbés contre la chèvre mais pas le cochon d’Inde.
https://www.abcam.com/index.html?datasheet=96920 (or use the following: https://www.abcam.com/index.html?datasheet=96920).
https://www.abcam.com/index.html?datasheet=96900 (or use the following: https://www.abcam.com/index.html?datasheet=96900).

Veuillez s’il vous plaît me confirmer quel anticorps vous préférez et nous allons vous l’envoyer comme geste pour la déception que vous avez eu avec le ab96942. N'hésitez pasà nous recontacter aussi si vous avez des autres questions.

Je me réjouis de votre réponse.

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Question

Bonjour

Je vous contact pour un probléme de spécificité d'un anti corps secondaire.
En effet nous avons commandé il y a enviros 4 mois deux anticorps . Un primaire Sheep polyclonal C-Fos (ab6167) et son anti corps secondaire spécifique
Donkey polyclonal secondary antibody to Sheep IgG -H et L ( DyLight 650) (ab96942)

Nous souhaitions faire des co-marquages avec des anti corps que nous avions déja au labo
-un goat polyclonal antibody to orexin A (SC-80070 Santa Cruz Biotechnology)et son secondaire Alaxa 555 Donkey anti goat (invitrogen)

Ces co marquages sont fait sur des coupes de cerveaux de souris perfusés au PAF 4% et post fixés au PAF puis cryoprotégés avec une solution de sucrose 20%.

Les resultats que nous avons obtenu avec ce co marquage semblais montrer une reconnaisance du goat anti orexin par l'anti Sheep.

Nous avons donc réalisé des tests de croisement avec differents anticorps primaires et votre anticorps secondaire anti Sheep Dy650

anti corps primaire
-gaot Anti orexin (SC-80070 Santa Cruz Biotechnology)
-guinea pig anti vasopresine (peninsula laboratories)

Je vous joint un ppt avec les resultats et les concetration des anticorps

Un test d'auto fluorescence du secondaire a été fait et il n'y avait pas de signal autofluorescent

Il y a donc un croissement de l'anti Sheep avec le goat et le guinea pig

ce qui est en plus problématique c'est que l'on a acheté le c-fos Sheep spécifiquement car nous étions intéréssé par le fait que c'était un hote qui nous n'avions pas et qui nous permettait donc de faire des co marquages doubles voir triples.

Sachant que vous garantissez vos anticorps que proposez vous pour contrer ce probleme

Si vous avec besoin de plus d'info n'hésité pas

Trés cordialement

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Answer

Merci de nous avoir contacté. Je suis désolée d'apprendre que vous n'êtes pas satisfaites avec un de nos anticorps.
Effectivement l'anticorps ab6167 est un anticorps non pré-absorbé. Ceci veux dire que la réactivité contre des autres immunoglobulines n'as pas été enlevé. Comme les immunoglobulines sont très conservées entre les espèces, il est donc normal que un anticorps contre un anticorps d'une espèce reconnait aussi des anticorps d'autres espèces. C'est pour cet raison que la pré-absorption est faite. Pour de doubles/triples marquages, nous recommandons donc d’utiliser toujours des anticorps pré-absorbées.
Comme je comprends par contre votre déception, nous allons faire une exception pour vous. Nous pouvons exceptionnellement vous remplacer cet anticorps avec un anticorps plus adapté. Malheureusement nous n’avons pas un anticorps contre le mouton couplé en DyLight 650 qui était pré-absorbé contre la chèvre et le cochon d’Inde.
Le ab102303 est un Rabbit polyclonal Secondary Antibody to Sheep IgG - Fc (DyLight® 650), pre-adsorbed DyLight® 650 conjugated. C’est anticorps était pré-absorbé contre le poulet, le cheval, humain, souris, lapin et rat. Il ne va donc pas crossréagir avec des immunoglobulines de ces espèces, mais nous savons pas s’il ne peux pas crossréagir avec les immunoglobulines de chèvre ou du cochon d’Inde.
Pour essayer de vous trouver un autre anticorps secondaire de notre catalogue, veuillez s’il vous plaît me confirmer quels fluorochromes vous pouvez considérer.
Veuillez aussi nous faire part de votre numéro de commande originale du ab6167 pour que nous puissions faire le remplacement.
Je me réjouis de votre réponse. N’hésitez pas à nous faire savoir, si vous avez des questions.

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Please note: All products are "FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES"
For licensing inquiries, please contact partnerships@abcam.com

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