Overview

  • Product name
  • Description
    Rabbit polyclonal to FANCA
  • Host species
    Rabbit
  • Specificity
    Detects a band at 130kDa in HeLa cell lysate that we believe corresponds to FANCA.
  • Tested applications
    Suitable for: WBmore details
  • Species reactivity
    Reacts with: Human
  • Immunogen

    Synthetic peptide:

    SRSYDHSENSDLVFG-C

    conjugated to KLH, corresponding to amino acids 995 - 1009 of Human FANCA.

Properties

  • Form
    Liquid
  • Storage instructions
    Shipped at 4°C. Upon delivery aliquot and store at -20°C or -80°C. Avoid repeated freeze / thaw cycles.
  • Storage buffer
    pH: 7.20
    Preservative: 0.01% Sodium azide
    Constituents: 0.42% Potassium phosphate, 0.87% Sodium chloride
  • Concentration information loading...
  • Purity
    Immunogen affinity purified
  • Clonality
    Polyclonal
  • Isotype
    IgG
  • Research areas

Applications

Our Abpromise guarantee covers the use of ab5063 in the following tested applications.

The application notes include recommended starting dilutions; optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

Application Abreviews Notes
WB 1/500 - 1/2000. Detects a band of approximately 130 kDa (predicted molecular weight: 163 kDa).

Target

  • Function
    DNA repair protein that may operate in a postreplication repair or a cell cycle checkpoint function. May be involved in interstrand DNA cross-link repair and in the maintenance of normal chromosome stability.
  • Involvement in disease
    Defects in FANCA are a cause of Fanconi anemia (FA) [MIM:227650]. FA is a genetically heterogeneous, autosomal recessive disorder characterized by progressive pancytopenia, a diverse assortment of congenital malformations, and a predisposition to the development of malignancies. At the cellular level it is associated with hypersensitivity to DNA-damaging agents, chromosomal instability (increased chromosome breakage), and defective DNA repair.
  • Post-translational
    modifications
    Phosphorylated upon DNA damage, probably by ATM or ATR. Phosphorylation is required for the formation of the nuclear complex. Not phosphorylated in cells derived from groups A, B, C, E, F, G, and H.
  • Cellular localization
    Nucleus. Cytoplasm. The major form is nuclear. The minor form is cytoplasmic.
  • Information by UniProt
  • Database links
  • Alternative names
    • FA 1 antibody
    • FA antibody
    • FA H antibody
    • FA1 antibody
    • FAA antibody
    • FACA antibody
    • FAH antibody
    • Fanca antibody
    • FANCA_HUMAN antibody
    • FANCH antibody
    • Fanconi anemia complementation group A antibody
    • Fanconi anemia complementation group H antibody
    • Fanconi anemia group A protein antibody
    • Fanconi anemia type 1 antibody
    • MGC75158 antibody
    • Protein FACA antibody
    see all

Images

  • Anti-FANCA antibody (ab5063) at 1/1500 dilution + HeLa whole cell lysate at 35 µg

    Secondary
    IRDye 800 conjugated Goat anti-Rabbit IgG [H&L] at 1/10000 dilution

    Performed under reducing conditions.

    Predicted band size: 163 kDa
    Observed band size: 130 kDa
    why is the actual band size different from the predicted?
    Additional bands at: 42 kDa, 75 kDa. We are unsure as to the identity of these extra bands.

References

This product has been referenced in:
  • Abdul-Sater Z  et al. FANCA safeguards interphase and mitosis during hematopoiesis in vivo. Exp Hematol 43:1031-1046.e12 (2015). IF . Read more (PubMed: 26366677) »
  • Vanuytsel K  et al. FANCA knockout in human embryonic stem cells causes a severe growth disadvantage. Stem Cell Res 13:240-50 (2014). WB . Read more (PubMed: 25108529) »
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Customer reviews and Q&As

1-5 of 5 Abreviews or Q&A

Question

Anbei der vollständig ausgefüllte Fragebogen!



Vielen dank!

Mit besten grüßen

1) Abcam product code ab 96089, ab 5063, ab54676, ab54645, ab 6264

2) Abcam order reference number or product batch number

3) Description of the problem: see pictures below, either to high cross reactivity or no signal detectable

4) Sample preparation:
Type of sample (whole cell lysates, fraction, recombinant protein…): whole cell lysate
Lysis buffer: RIPA
Protease inhibitors: sigma (http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/p8340?lang=de®ion=AT)
Phosphatase inhibitors: sigma
Reducing agent
Boiling for ≥5 min? yes/no yes
Protein loaded ug/lane or cells/lane 15-100 µg
Positive control yes
Negative control

5) Percentage of gel 10%
Type of membrane Nylon
Protein transfer verified yes (Ponseau red)
Blocking agent and concentration 5% BSA in 1xTBS/T (as well as 5% milk in 1xTBS/T but in milk no signal could be detected)
Blocking time 4 °C over night, as well as 1 h room temperature
Blocking temperature see above

6) Primary antibody (If more than one was used, describe in “additional notes”) :
Concentration or dilution: FancG 1:500, FancA 1:1000, XPD 1:1000, CSB 1:1500
Diluent buffer 5% BSA as well as milk in 1xTBS/T
Incubation time over night
Incubation temperature: 4°C

7) Secondary antibody:
Species:
Reacts against:
Concentration or dilution 1:1000
Diluent buffer 5% BSA in 1x TBS/T
Incubation time: 1h
Incubation temperature: room temperature
Fluorochrome or enzyme conjugate: HRP

8) Washing after primary and secondary antibodies:
Buffer 1x TBS/T
Number of washes 3

9)Detection method
10) How many times have you run this staining?
Do you obtain the same results every time?
What steps have you altered to try and optimize the use of this antibody?
* changed incubation time
* changes milk to BSA
* blocked over night or 1h

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Answer

Vielen Dank für Ihren Anruf und dafür, dass Sie sich die Zeit genommen haben, unseren Fragebogen auszufüllen.

Es tut mir leid, dass Sie Probleme mit unseren Antikörper hatten.

Um Ihr Problem zu lösen, möchte ich die folgenden Vorschläge zu Veränderung Ihres Protokolls machen, bzw noch ein paar zusätzliche Fragen stellen:

1. Um was für Zelllinien handelt es sich hier, bzw aus welcher Spezies wurden die Zellen ursprünglich gewonnen? Sind die Zellen transfektiert?

2. Was ist Ihre Positiv- Kontrolle?

3.Verwenden Sie einen Anti-Mouse Sekundär- AKim falle der ab54645 und ab54676?

4. Verwenden Sie immer einen frischen Blot pro Antikörper oder strippen Sie diesen zwischendurch?

5. Haben Sie Ihre Zellen transfektiert oder wollen Sie das endogene Protein detektieren? Für den ersten Fall senken Sie den Proteingehalt auf 5- 10ug pro Bahn ab, im zweiten Fall gehen Sie runter auf 20 ug.

6. Filtern Sie die Blockmittelllösung, dadurch sollten die schwarzen Punkte verschwinden und die Ergebnisse klarer werden.

7. Senken Sie die Konzentration der Sekundär- Antikörper auf mindestens 1/5000 ab.

8. Blockieren Sie weiterhin eine Stunde und inkubieren sie in der höchsten von uns empfohlenenVerdünnung über Nacht bei 4C.



Bitte lassen Sie mich wissen, ob ich Ihnen helfen konnte und zögern Sie nicht, sich wieder bei uns zu melden, falls Sie weitere Fragen haben.

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Answer

Vielen Dank für Ihren Anruf.

Es tut mir leid zu hören, dass Sie Probleme mit diesen Antikörpern haben.

Ich habe unseren Fragebogen als Word-Dokument an diese E-Mail angehängt. Durch das Ausfüllen des Fragebogens erhalten wir alle nötigen Informationen über Ihre Proben und Ihr Protokoll. Sobald Sie dieses Formular an uns zurückgeschickt haben, werden wir uns Ihr Protokoll ansehen und möglichst Veränderungsvorschläge machen, die Ihre Ergebnisse verbessern werden. Falls sich herausstellt, dass der Antikörper nicht so funktioniert, wie auf dem Datenblatt beschrieben und er innerhalb der letzten 180 Tage gekauft wurde, werden wir Ihnen gerne einen Ersatz oder eine Gutschrift schicken.


Ich freue mich, bald wieder von Ihnen zu hören.

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Abreviews
Application
Western blot
Sample
Human Cell lysate - whole cell (HeLa)
Loading amount
50 µg
Specification
HeLa
Gel Running Conditions
Reduced Denaturing
Blocking step
Milk as blocking agent for 1 hour(s) and 0 minute(s) · Concentration: 5% · Temperature: 25°C

Abcam user community

Verified customer

Submitted Aug 14 2007

Abcam guarantees this product to work in the species/application used in this Abreview.
Application
Western blot
Sample
Human Cell lysate - whole cell (THP1 - Human acute monocytic leukemia cell)
Loading amount
150 µg
Specification
THP1 - Human acute monocytic leukemia cell
Blocking step
BSA as blocking agent for 1 hour(s) and 0 minute(s) · Concentration: 3% · Temperature: 20°C

Dr. Wei-Ting Lu

Verified customer

Submitted Jul 24 2007

Abcam guarantees this product to work in the species/application used in this Abreview.
Application
Western blot
Sample
Human Cell lysate - whole cell (Cal51 & SW620)
Loading amount
750 cells
Specification
Cal51 & SW620
Blocking step
Milk as blocking agent for 1 hour(s) and 0 minute(s) · Concentration: 10%

Mr. Richard Allum

Verified customer

Submitted Oct 24 2006

Please note: All products are "FOR RESEARCH USE ONLY AND ARE NOT INTENDED FOR DIAGNOSTIC OR THERAPEUTIC USE"

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