Overview

  • Product name

  • Description

    Mouse monoclonal to FOXA2
  • Host species

    Mouse
  • Tested applications

    Suitable for: IP, WB, ELISA, Flow Cyt, ICC/IFmore details
  • Species reactivity

    Reacts with: Human
    Predicted to work with: Mouse, Rat, Cow, Dog, Rhesus monkey, Opossum
  • Immunogen

    Recombinant fragment with tag: HLKPEHHYAF NHPFSINNLM SSEQQHHHSH HHHQPHKMDL KAYEQVMHYP GYGSPMPGSL AMGPVTNKTG LDASPLAADT SYYQGVYSRP IMNSS, corresponding to amino acids 363-458 of Human FOXA2

  • Positive control

    • HepG2 whole cell lysate (ab7900).
  • General notes

    This product was changed from ascites to tissue culture supernatant on 17/04/2019. Please note that the dilutions may need to be adjusted accordingly. If you have any questions, please do not hesitate to contact our scientific support team.

     

Properties

Applications

Our Abpromise guarantee covers the use of ab60721 in the following tested applications.

The application notes include recommended starting dilutions; optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

Application Abreviews Notes
EMSA Use at an assay dependent concentration. PubMed: 20650961
IP Use at an assay dependent concentration.
WB Use at an assay dependent concentration. Detects a band of approximately 50 kDa (predicted molecular weight: 48 kDa).
ELISA Use at an assay dependent concentration. The detection limit for recombinant tagged FOXA2 is approximately 0.03ng/ml as a capture antibody.
Flow Cyt Use at an assay dependent concentration.

ab170191 - Mouse monoclonal IgG2a, is suitable for use as an isotype control with this antibody.

 

ICC/IF Use at an assay dependent concentration.

Target

  • Function

    Transcription factor that is involved in embryonic development, establishment of tissue-specific gene expression and regulation of gene expression in differentiated tissues. Is thought to act as a 'pioneer' factor opening the compacted chromatin for other proteins through interactions with nucleosomal core histones and thereby replacing linker histones at target enhancer and/or promoter sites. Binds DNA with the consensus sequence 5'-[AC]A[AT]T[AG]TT[GT][AG][CT]T[CT]-3' (By similarity). In embryonic development is required for notochord formation. Involved in the development of multiple endoderm-derived organ systems such as the liver, pancreas and lungs; FOXA1 and FOXA2 seem to have at least in part redundant roles. Originally discribed as a transcription activator for a number of liver genes such as AFP, albumin, tyrosine aminotransferase, PEPCK, etc. Interacts with the cis-acting regulatory regions of these genes. Involved in glucose homeostasis; regulates the expression of genes important for glucose sensing in pancreatic beta-cells and glucose homeostasis. Involved in regulation of fat metabolism. Binds to fibrinogen beta promoter and is involved in IL6-induced fibrinogen beta transcriptional activation.
  • Sequence similarities

    Contains 1 fork-head DNA-binding domain.
  • Post-translational
    modifications

    Phosphorylation on Thr-156 abolishes binding to target promoters and subsequent transcription activation upon insulin stimulation.
  • Cellular localization

    Nucleus. Cytoplasm. Shuttles between the nucleus and cytoplasm in a CRM1-dependent manner and in response to insulin signaling via AKT1 is exported from the nucleus.
  • Information by UniProt
  • Database links

  • Alternative names

    • Forkhead box A2 antibody
    • Forkhead box protein A2 antibody
    • FOX A2 antibody
    • foxa2 antibody
    • FOXA2_HUMAN antibody
    • Hepatic nuclear factor 3 beta antibody
    • Hepatocyte nuclear factor 3 antibody
    • Hepatocyte nuclear factor 3 beta antibody
    • Hepatocyte nuclear factor 3-beta antibody
    • HNF 3B antibody
    • HNF-3-beta antibody
    • HNF-3B antibody
    • HNF3B antibody
    • MGC19807 antibody
    • TCF 3B antibody
    • TCF-3B antibody
    • TCF3B antibody
    • Transcription factor 3B antibody
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Images

  • ab60721 at 10 ug/ml staining FOXA2 in human Hella cells by Immunocytochemistry/ Immunofluorescence.

    This image was generated using the ascites version of the product.

  • Anti-FOXA2 antibody (ab60721) at 1 µg/ml + HepG2 cell lysate at 25 µg

    Predicted band size: 48 kDa
    Observed band size: 50 kDa
    why is the actual band size different from the predicted?
    Additional bands at: 40 kDa, 42 kDa. We are unsure as to the identity of these extra bands.



    This image was generated using the ascites version of the product.

  • Overlay histogram showing HepG2 cells stained with ab60721 (red line). The cells were fixed with 80% methanol (5 min) and then permeabilized with 0.1% PBS-Tween for 20 min. The cells were then incubated in 1x PBS / 10% normal goat serum / 0.3M glycine to block non-specific protein-protein interactions followed by the antibody (ab60721, 0.5µg/1x106 cells) for 30 min at 22ºC. The secondary antibody used was DyLight® 488 goat anti-mouse IgG (H+L) (ab96879) at 1/500 dilution for 30 min at 22ºC. Isotype control antibody (black line) was mouse IgG2a [ICIGG2A] (ab91361, 1µg/1x106 cells) used under the same conditions. Acquisition of >5,000 events was performed.

    This image was generated using the ascites version of the product.

     

  • Immunoprecipitation analysis of FOXA2 transfected lysate using ab60721 and protein A magnetic bead.

    This image was generated using the ascites version of the product.

References

This product has been referenced in:

  • Azimi SM  et al. Combinatorial programming of human neuronal progenitors using magnetically-guided stoichiometric mRNA delivery. Elife 7:N/A (2018). Read more (PubMed: 29714688) »
  • Li H  et al. Rapid generation of gene-targeted EPS-derived mouse models through tetraploid complementation. Protein Cell N/A:N/A (2018). Read more (PubMed: 29948855) »
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Customer reviews and Q&As

1-4 of 4 Abreviews or Q&A

Answer

Vielen Dank für das Senden der Bilder.

Es tut mir leid, dass Sie Probleme mit diesem Antikörper hatten. Wie von Ihnen erwünscht, habe ich eine kostenlose Ersatzlieferung für Sie in Auftrag gegeben mit dem alternativen Maus Antikörper gegen Foxa2 ab117542. https://www.abcam.com/index.html?datasheet=117542 (or use the following: https://www.abcam.com/index.html?datasheet=117542). Ich hoffe diese Wahl entspricht Ihren Vorstellungen.

Die Lieferunghat die Referenznummer xx und sollte morgen bei Ihnen ankommen.

Ich wünsche Ihnen viel Erfolg für Ihr Projekt. Bitte zögern Sie nicht, sich wieder bei uns zu melden, falls Sie weitere Fragen haben.

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Answer

Vielen Dank für Ihre Antwort und diese zusätzlichen Angaben.

Leider waren die Bilder nicht im Anhang. Können Sie diese uns nochmals senden bitte? Vielen Dank.

Es tut uns leid, dass der Antikörper nicht so funktioniert wie erwartet. Wir werden Ihnen gerne einen Ersatzantikörper senden oder den Antikörper rückerstatten. Möchten Sie ein neues Röhrchen des ab60721 oder hätten Sie lieber einen alternativen Antikörper oder eine Rückerstattung?

Ich freue mich auf Ihre Antwort.

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Answer

Vielen Dank für Ihre Anfrage.

Leider konnte ich die Bilder im Anhang nicht öffnen. Könnten Sie mir diese bitte nochmals senden, vielleicht in einem anderen Format?

Es tut mir leid, dass Sie Probleme mit unserem Antikörper hatten. Wir garantieren all unsere Produkte so zu funktionieren, wie auf dem Datenblatt beschrieben. Falls ein Produkt fehlerhaft ist, werden wir es Ihnen gerne ersetzen - siehe auch unsere Garantie unter https://www.abcam.com/abpromise

Um die Ursache des Problems besser zu verstehen, bitte ich Sie mir die folgenden Fragen noch zu beantworten. Vielen Dank für Ihre Kooperation.

1.) Wurden die Zellen vorbehandelt? FOXA2 kann auch im Zytoplasma sein. Durch Insulinstimulierung zum Beispiel, wird FOXA2 aus dem Nukleus exportiert. http://www.uniprot.org/uniprot/P35583

2.) Wie wurden die Zellen fixiert und eventuell permeabilisiert? Die Fixierung mit Paraformaldehyde funktioniert durch krosslinken, während die Fixierung mit Aceton/Methanol durch Präzipitation funktioniert. In der Tat lohnt es sich deshalb, verschieden Fixierungsmethoden auszuprobieren. Werden Zellen mit Paraformaldehyde fixiert, ist eine Permeabilisierung notwending. https://www.abcam.com/index.html?pageconfig=resource&rid=11462

3.) Was für Verdünnungen des ab60721 wurden eingesetzt? War das Resultat anders mit einer hohen Verdünnung?

Ich freue mich, bald wieder von Ihnen zu hören.

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Question
Answer

Vielen Dank für Ihren Anruf.

Wie versprochen habe ich alle unsere FOXA2-Antikörper darauf geprüft, welche Isoformen von FOXA2 sie erkennen. Leider sind alle Immunogene in Regionen lokalisiert, die in beiden Isoformen vorkommen (Details siehe jeweiliges Datenblatt), und daher detektieren die Antikörper immer beide Isoformen. Wir haben also leider keinen Antikörper erhältlich, der zwischen den Isoformen unterscheiden kann.

Es tut mir leid, dass ich keine besseren Nachrichten für Sie habe. Ich hoffe, diese Informationen helfen Ihnen dennoch weiter. Bitte zögern Sie nicht, sich wieder bei uns zu melden, falls Sie weitere Fragen haben.

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Please note: All products are "FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES"
For licensing inquiries, please contact partnerships@abcam.com

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