Overview

  • Product name

    Anti-Hepatitis C virus NS5B antibody
  • Description

    Rabbit polyclonal to Hepatitis C virus NS5B
  • Host species

    Rabbit
  • Tested applications

    Suitable for: WB, IP, ELISAmore details
  • Species reactivity

    Reacts with: Hepatitis C virus
  • Immunogen

    Recombinant protein NS5B (part of the NAS5AB recombinant antigen) from Hepatitis C virus with C-terminal truncation of 21 amino acid residues.

  • Positive control

    • Hepatitis C Virus NS5B expressed in Huh7 cells

Properties

Applications

Our Abpromise guarantee covers the use of ab65410 in the following tested applications.

The application notes include recommended starting dilutions; optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

Application Abreviews Notes
WB 1/1000. Predicted molecular weight: 65 kDa.
IP Use at an assay dependent dilution.
ELISA Use at an assay dependent dilution.

Target

  • Relevance

    HCV is a positive, single-stranded RNA virus in the Flaviviridae family. The genome is approximately 10,000 nucleotides and encodes a single polyprotein of about 3,000 amino acids. The polyprotein is processed by host cell and viral proteases into three major structural proteins, and several non-structural proteins necessary for viral replication, of which NS5B is one. NS5B RNA-dependant RNA polymerase is responsible for replication of the hepatitis C viral genome, and is currently a principal target for chemotherapeutic inhibition of HCV replication. Hepatitis C virus (HCV) can cause chronic hepatitis, cirrhosis and hepatocellular carcinoma. At present there is no vaccine effective against HCV. Host membrane insertion occurs after processing by the NS3 protease.
  • Database links

    • Alternative names

      • HCV NS5B antibody
      • Hepatitis C virus NS5B antibody
      • p68 antibody
      • RNA dependent RNA polymerase antibody
      • RNA directed RNA polymerase antibody
      see all

    References

    This product has been referenced in:

    • Pène V  et al. Dynamic Interaction of Stress Granules, DDX3X, and IKK-a Mediates Multiple Functions in Hepatitis C Virus Infection. J Virol 89:5462-77 (2015). Read more (PubMed: 25740981) »
    • McGivern DR  et al. Protease Inhibitors Block Multiple Functions of the NS3/4A Protease-Helicase during the Hepatitis C Virus Life Cycle. J Virol 89:5362-70 (2015). Read more (PubMed: 25740995) »
    See all 3 Publications for this product

    Customer reviews and Q&As

    1-3 of 3 Abreviews or Q&A

    Question

    hier ist der ausgefüllte Fragebogen.
    Mit freundliche Grüssen,

    1) Abcam product code: ab100895
    2) Abcam order reference number or product batch number:
    3) Description of the problem: Nonspecific binding on Western blot, no specific bands with genotype 2A
    4) Sample preparation:
    Type of sample (whole cell lysates, fraction, recombinant protein…): whole cell lysate
    Lysis buffer: RIPA
    Protease inhibitors: PMSF, AEBSF, 104 mM, Aprotinin, 80 μM,Bestatin, 4 mM
    E-64, 1.4 mM, Leupeptin, 2 mM, Pepstatin A, 1.5mM
    Reducing agent:: SDS, 2-mercaptoethanol
    Boiling for ≥5 min? yes
    Protein loaded ug/lane: 70 µg
    Positive control: yes, HCV core / ns5a antibody staining
    Negative control: yes, uninfected cell lysate
    5) Percentage of gel
    Type of membrane: Hybond ECL
    Protein transfer verified: yes, marker is well transferred and other antibodies work well
    Blocking agent and concentration: 10% milk-TBST
    Blocking time: 1h
    Blocking temperature: RT
    6) Primary antibody (If more than one was used, describe in “additional notes”) : HCV NS5b, HCV Core, HCV NS5a
    Concentration or dilution 1:1000
    Diluent buffer: 1% milk-TBST
    Incubation time: over night
    Incubation temperature: 4°C
    7) Secondary antibody: goat-anti mouse HRP labeled
    Species: goat
    Reacts against: mouse
    Concentration or dilution 1:10000
    Diluent buffer: 1% milk-TBST
    Incubation time: 1h
    Incubation temperature: RT
    Fluorochrome or enzyme conjugate: HRP
    8) Washing after primary and secondary antibodies:
    Buffer: TBST
    Number of washes: 3 times
    9) Detection method: ECL
    10) How many times have you run this staining? 2x
    Do you obtain the same results every time? yes
    What steps have you altered to try and optimize the use of this antibody?
    Document attachment: Attaching images of your blot is strongly recommended and can greatly speed up our investigation of your problem.

    Read More
    Answer

    Vielen Dank dafür, dass Sie sich die Zeit genommen haben, unseren Fragebogen auszufüllen.



    Es tut mir leid, dass Sie Probleme mit unserem Antikörper hatten.

    Um Ihr Problem zu lösen, möchte ich die folgenden Vorschläge zu Veränderung Ihres Protokolls machen:

    1. Um eine Maskierung Ihres Zielproteins zu vermeiden, möchte ich vorschlagen, den Gehalt der Blocksubstanz auf maximal 5% abzusenken. Wie meine Kollegin schon anmerkte, haben wir die Erfahrung gemacht, dass BSA in vielen Faellen das bessere Blockmittel ist.

    2. Um die Nebenbanden abzuschwächen, mochte ich vorschlagen die Proteinladung auf 30 ug pro Bahn zu reduzieren: So sollte noch genügend Zielprotein vorhanden sein, allerdings wird die Möglichkeit der unspezifischen Bindungen reduziert.

    3. Leider wurden keine Angaben zum Gel gemacht: Handelt es sich um ein natives oder reduzierendes Gel? Die meisten unserer Antikörper wurden nur unter denaturierenden/ reduzierenden WB Bedingungen getestet. Ich möchte daher vorschlagen, ein reduzierendes Gel zu verwenden, falls Sie dies nicht schon tun.


    Bitte lassen Sie mich wissen, ob ich Ihnen helfen konnte. Wenn ein Antikörper nicht so funktioniert wie wir diesen auf unserem Datenblatt beschreiben, bieten wir unseren Kunden gerne einen kostenlosen Ersatz, eine Gutschrift oder eine Erstattung an, wenn das Produkt wie auf dem Datenblatt beschrieben behandelt und innerhalb von 180 Tagen nach Erhalt reklamiert wurde.

    Sie nicht, sich wieder bei uns zu melden, falls Sie weitere Fragen haben.




    Read More

    Answer

    Vielen Dank dafür, dass Sie nachhaken.

    Leider haben wir noch keine guten Nachrichten für Sie:

    Wie versprochen haben wir uns in den entsprechenden Laboren erkundigt. Bislang haben wir für unsere anti-HCV NS5B-Antikörper ab35586 und ab65410 in Erfahrung bringen können, dass sie leider NICHT mit Genotyp 2a kreuzreagieren. (Derzeit haben wir anti-NS3-Antikörper verfügbar, die gut mit Genotyp 2a-Isolaten funktionieren, falls das eine Alternative für Sie sein könnte: ab13830 oder ab65407).

    https://www.abcam.com/index.html?datasheet=13830 (or use the following: https://www.abcam.com/index.html?datasheet=13830).
    https://www.abcam.com/index.html?datasheet=65407 (or use the following: https://www.abcam.com/index.html?datasheet=65407).

    Im Moment warten wir noch auf die Rückmeldung bezüglich des NS5B-Antikörpers ab100895. Wir haben in der Vergangenheit schon versucht, in Erfahrung zu bringen, mit welchen Isolaten dieser Antikörper getestet wurde (siehe Scientific Support auf dem Datenblatt). Leider konnte das Labor bisher noch keine schlüssigen Informationen liefern, aber wir bleiben dran!

    Natürlich möchte ich Ihnen kein Produkt aufdrängen, aber wenn Sie nicht länger warten wollen oder können,wäre vielleicht unser 100% Abreview Rabatt für Sie interessant: Wenn Sie ab100895 mit Genotyp 2a-Isolaten testen möchten, können Sie zum Dank einen kostenlosen Primärantikörper Ihrer Wahl von uns erhalten. Im Austausch würden wir uns über ein Abreview für ab100895 freuen. Die Bedingungen zu unserem Testprogramm können Sie unter dem folgenden Link nachlesen: https://www.abcam.com/collaborationdiscount

    Vielen Dank für Ihre Geduld.

    Ich wünsche Ihnen ein schönes Wochenende!

    Read More

    Answer

    Thank you for contacting us. I am sorry for the delay in this response. ab100895 is a Mouse monoclonal antibody to Hepatitis C virus NS5B which has been used previously for ELISA and Western blotting. Unfortunately I have been unable to confirm if this antibody would recognise both 1b or 2a type. We do however have a further two antibodies against the same target: ab35586 and ab65410 which are both rabbit polyclonals which may also be suitable. These two antibodies have been tested for activity against  directly for their activity against genotypes 1a and 1b. Whilst other genotypes have not been tested being a polyclonal, it is expected to recognise other genotypes as well. I hope this information is helpful to you. Please do not hesitate to contact us if you need any more advice or information.

    Read More

    Please note: All products are "FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES"
    For licensing inquiries, please contact partnerships@abcam.com

    Sign up