Overview

  • Product name

    Human VEGFA ELISA Kit
    See all VEGFA kits
  • Detection method

    Colorimetric
  • Precision

    Intra-assay
    Sample n Mean SD CV%
    Overall 8 6.2%
    Inter-assay
    Sample n Mean SD CV%
    Overall 8 4.3%
  • Sample type

    Cell culture supernatant, Serum, Plasma
  • Assay type

    Sandwich (quantitative)
  • Sensitivity

    7.9 pg/ml
  • Range

    15.6 pg/ml - 1000 pg/ml
  • Recovery

    Sample specific recovery
    Sample type Average % Range
    Cell culture supernatant 88% - 98%
    Serum 81% - 88%

  • Assay duration

    Multiple steps standard assay
  • Species reactivity

    Reacts with: Human
  • Product overview

    Abcam’s VEGFA Human in vitro ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) kit is designed for accurate quantitative measurement of Human VEGFA concentrations in Cell culture supernatant, serum and plasma (EDTA, citrate, heparin).

    VEGFA specific antibodies have been precoated onto 96-well plates. Standards and test samples are added to the wells and then incubated at room temperature. After washing, a Biotin-conjugated anti-Human VEGFA detection antibody is added then incubated at room temperature. Following washing Streptavidin-HRP conjugate is added to each well, incubated at room temperature then again washed. TMB is added and then catalyzed by HRP to produce a blue color product that changes into yellow after addition of an acidic stop solution. The density of yellow coloration is directly proportional to the amount of VEGFA captured on the plate.

  • Tested applications

    Suitable for: Sandwich ELISAmore details
  • Platform

    Microplate

Properties

  • Storage instructions

    Store at +4°C. Please refer to protocols.
  • Components 1 x 96 tests
    20X Assay Buffer Concentrate 1 x 5ml
    20X Wash Buffer Concentrate 1 x 50ml
    Adhesive Films 6 units
    Biotin-Conjugate anti-human VEGFA polyclonal antibody 1 x 120µl
    Human VEGFA coated microplate (12 x 8 wells) 1 unit
    Human VEGFA Standard Lyophilized 2 vials
    Sample Diluent 1 x 12ml
    Stop Solution (1M Phosphoric acid) 1 x 15ml
    Streptavidin-HRP 1 x 150µl
    TMB Substrate Solution 1 x 15ml
  • Research areas

  • Function

    Growth factor active in angiogenesis, vasculogenesis and endothelial cell growth. Induces endothelial cell proliferation, promotes cell migration, inhibits apoptosis and induces permeabilization of blood vessels. Binds to the FLT1/VEGFR1 and KDR/VEGFR2 receptors, heparan sulfate and heparin. NRP1/Neuropilin-1 binds isoforms VEGF-165 and VEGF-145. Isoform VEGF165B binds to KDR but does not activate downstream signaling pathways, does not activate angiogenesis and inhibits tumor growth.
  • Tissue specificity

    Isoform VEGF189, isoform VEGF165 and isoform VEGF121 are widely expressed. Isoform VEGF206 and isoform VEGF145 are not widely expressed.
  • Involvement in disease

    Defects in VEGFA are a cause of susceptibility to microvascular complications of diabetes type 1 (MVCD1) [MIM:603933]. These are pathological conditions that develop in numerous tissues and organs as a consequence of diabetes mellitus. They include diabetic retinopathy, diabetic nephropathy leading to end-stage renal disease, and diabetic neuropathy. Diabetic retinopathy remains the major cause of new-onset blindness among diabetic adults. It is characterized by vascular permeability and increased tissue ischemia and angiogenesis.
  • Sequence similarities

    Belongs to the PDGF/VEGF growth factor family.
  • Cellular localization

    Secreted. VEGF121 is acidic and freely secreted. VEGF165 is more basic, has heparin-binding properties and, although a signicant proportion remains cell-associated, most is freely secreted. VEGF189 is very basic, it is cell-associated after secretion and is bound avidly by heparin and the extracellular matrix, although it may be released as a soluble form by heparin, heparinase or plasmin.
  • Information by UniProt
  • Alternative names

    • Vascular endothelial growth factor A
    • Vascular permeability factor
    • VEGF-A
    • Vegfa
    • VEGFA_HUMAN
    • VPF
    see all
  • Database links

Applications

Our Abpromise guarantee covers the use of ab119566 in the following tested applications.

The application notes include recommended starting dilutions; optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

Application Abreviews Notes
Sandwich ELISA Use at an assay dependent concentration.

Images

  • Representative Standard Curve using ab119566.

Protocols

References

This product has been referenced in:

  • Meng X  et al. DNA damage repair alterations modulate M2 polarization of microglia to remodel the tumor microenvironment via the p53-mediated MDK expression in glioma. EBioMedicine 41:185-199 (2019). Read more (PubMed: 30773478) »
  • Ortega FJ  et al. Targeting the circulating microRNA signature of obesity. Clin Chem 59:781-92 (2013). Read more (PubMed: 23396142) »
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Customer reviews and Q&As

Question


Estimado distribuidor,

Quiero informar de algunos problemas detectados a la hora de utilizar els kit comercial VEGFA Human ELISA Kit (with color giving dyes)(ab119566; Lot No: XXXX). Por otro lado, necesito cierta información urgente para intentar solventar algunas incidencias antes de perder el experimento que ya está en marcha.

En primer lugar existen ciertas irregularidades en el protocolo. Por ejemplo en la línea 1 de la página 22 dice: "5. Add 100 ul of Diluent Sample in duplicate to all wells" cuando con toda seguridad debería decir "... to blank wells" dado que, en caso contrario, NO hay suficiente Diluent Sample para hacer toda la ELISA. Debido a esta eventalidad me he visto obligado a sustituir el Diluent Sample por agua destilada y el volumen final para este primer paso es de 200 ul. No se hasta que punto esto puede afectar el resultado final de la experiencia.

El segundo error, este, creo, mucho más importante está en la primera línea de la página 14: "Reconstitution volumen is stated on the label of the standard vial." No he podido encontrar este tipo de información ni en el vial ni en ningún otro sitio por lo que les rogaría, por favor, me enviasen por e-mail lo antes posible la cantidad de standard liofilizado que se supone hay en el vial de este kit (Lot No: XXXX) para que pueda recalcular las concentraciones reales de mi recta patrón.

Muchas gracias de antemano.
Quedo a la espera de su respuesta para tratar de solventar el asunto sin más problemas.

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Answer

Gracias por contactarnos y alertarnos de los problemas experimentados con este kit. Lamento la espera.

Respecto al punto 5 del apartado 8 (Assay Method), como bien indicas, en lugar de añadir 100ul de Sample Diluent a todos los pocillos, debería indicar a los “Blank Wells”. Gracias por la puntualización, y siento mucho los inconvenientes que pueda haber generado. Voy a comunicar el error a las personas responsables para que se cambie el protocolo lo antes posible. También voy a consultar con mis compañeros del laboratorio el efecto de añadir agua destilada en lugar de Sample Diluent a los pocillos, en cuanto tenga una respuesta te lo comunico.

Igualmente voy a chequear con ellos que el volumen de reconstitución esté indicado en el vial, y averiguar el volumen para vuestro lote concreto. De nuevo, te pido disculpas por el error y las molestias causadas.

Supongo que necesitarás con urgencia que te resuelva estas dudas, le daré toda la prioridad posible. En cualquier caso, debido a los problemas que hayan podido acarrear estos errores, si te conviene, te puedo enviar un nuevo kit de forma completamente gratuita para compensar por ello (para hacerlo, os pediría que por favor me indicarais el numero de pedido del kit).

En cuanto tenga una respuesta te escribo de nuevo, y por favor, indícame si debo proceder con el pedido gratuito para compensar de alguna manera.

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