Overview

  • Product name

    Anti-PCNA antibody [5E6/2]
    See all PCNA primary antibodies
  • Description

    Mouse monoclonal [5E6/2] to PCNA
  • Host species

    Mouse
  • Tested applications

    Suitable for: WB, IP, ELISAmore details
  • Species reactivity

    Reacts with: Saccharomyces cerevisiae
  • Immunogen

    Purified recombinant full length his tagged PCNA from Saccharomyces cerevisiae, produced in Escherichia coli.

Properties

Applications

Our Abpromise guarantee covers the use of ab70472 in the following tested applications.

The application notes include recommended starting dilutions; optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

Application Abreviews Notes
WB Use at an assay dependent dilution. Predicted molecular weight: 29 kDa.
IP Use at an assay dependent dilution.
ELISA Use at an assay dependent dilution.

Target

  • Function

    This protein is an auxiliary protein of DNA polymerase delta and is involved in the control of eukaryotic DNA replication by increasing the polymerase's processibility during elongation of the leading strand. Induces a robust stimulatory effect on the 3'-5' exonuclease and 3'-phosphodiesterase, but not apurinic-apyrimidinic (AP) endonuclease, APEX2 activities. Has to be loaded onto DNA in order to be able to stimulate APEX2.
  • Sequence similarities

    Belongs to the PCNA family.
  • Post-translational
    modifications

    Upon methyl methanesulfonate-induced DNA damage, mono-ubiquitinated by the UBE2B-RAD18 complex on Lys-164. This induces non-canonical polyubiquitination on Lys-164 through 'Lys-63' linkage of ubiquitin moieties by the E2 complex UBE2N-UBE2V2 and the E3 ligases, HLTF, RNF8 and SHPRH, which is required for DNA repair. 'Lys-63' polyubiquitination prevents genomic instability on DNA damage. Monoubiquitination at Lys-164 also takes place in undamaged proliferating cells, and is mediated by the DCX(DTL) complex, leading to enhance PCNA-dependent translesion DNA synthesis.
    Acetylated in response to UV irradiation. Acetylation disrupts interaction with NUDT15 and promotes degradation.
  • Cellular localization

    Nucleus. Forms nuclear foci representing sites of ongoing DNA replication and vary in morphology and number during S phase. Together with APEX2, is redistributed in discrete nuclear foci in presence of oxidative DNA damaging agents.
  • Information by UniProt
  • Database links

    • Alternative names

      • ATLD2 antibody
      • cb16 antibody
      • Cyclin antibody
      • DNA polymerase delta auxiliary protein antibody
      • etID36690.10 antibody
      • fa28e03 antibody
      • fb36g03 antibody
      • HGCN8729 antibody
      • MGC8367 antibody
      • Mutagen-sensitive 209 protein antibody
      • OTTHUMP00000030189 antibody
      • OTTHUMP00000030190 antibody
      • PCNA antibody
      • Pcna/cyclin antibody
      • PCNA_HUMAN antibody
      • PCNAR antibody
      • Polymerase delta accessory protein antibody
      • Proliferating cell nuclear antigen antibody
      • wu:fa28e03 antibody
      • wu:fb36g03 antibody
      see all

    References

    This product has been referenced in:

    • Paul Solomon Devakumar LJ  et al. Effective mismatch repair depends on timely control of PCNA retention on DNA by the Elg1 complex. Nucleic Acids Res 47:6826-6841 (2019). Read more (PubMed: 31114918) »
    • Gali VK  et al. Identification of Elg1 interaction partners and effects on post-replication chromatin re-formation. PLoS Genet 14:e1007783 (2018). Read more (PubMed: 30418970) »
    See all 10 Publications for this product

    Customer reviews and Q&As

    1-4 of 4 Abreviews or Q&A

    Answer

    Gracias por tu respuesta.
    No hay ningún problema en reemplazaros el anticuerpo por otro diferente, nuestra garantía Abpromise contempla esta posibilidad.
    Acabo de realizar el pedido, completamente gratuito del anticuerpo ab104232 como solicitas. Recibiréis una confirmación automática del mismo con más detalles.
    Si necesitáis cualquier información referente al pedido, no dudéis en contactarnos, referenciando el número de éste: XXXXX.
    Te recuerdo que la garantía Abpromise cubre también a los reemplazos gratuitos, así que si tuvierais cualquier otro problema, o requirierais mas información / asistencia, por favor, no dudéis en volvernos a contactar.

    Read More

    Answer

    Muchas gracias por mandarnos más detalles del protocolo.
    Lamento mucho los inconvenientes causados, y tal y como especifica nuestra garantía Abpromise, os enviaré un reemplazo, reembolso, o vale sin caducidad en compensación.
    He comprobado que actualmente no tenemos ningún lote diferente al último recibido en stock. Si lo preferís podemos enviaros un anticuerpo contra una proteína deferente, u otro diferente también contra PCNA. Las alternativas validadas en WB se encuentran en el siguiente enlace:
    https://www.abcam.com/index.html?pageconfig=searchresults&search=PCNA&pt=1&sk=app&sv=69&sn=WB&l=2&fViewMore=1
    Quedo pues a la espera de que me confirméis cómo podemos ayudaros a resolver este incidente.
    Muchas gracias por vuestra colaboración.

    Read More

    Question
    Answer

    Muchas gracias por reenviar el cuestionario.
    Para tratar de obtener una señal más intensa os recomiendo llevar a cabo un lisado de la fracción nuclear en lugar de toda la célula. Para ello, podéis usar un buffer como RIPA, adecuado para este propósito u otro protocolo de fraccionamiento nuclear.
    Es posible que el tag HA esté enmascarando el epítopo y el anticuerpo no tenga acceso al mismo. ¿Es posible realizar el western usando el wild type sin tag?
    En cuanto a la cantidad de muestra cargada por calle, ¿se han cargado 30mg o 30ug? No recomendamos cargar más de 40ug, para no saturar la membrana.
    Otra prueba que podéis intentar para optimizar el resultado es diluir los anticuerpos en TBST sin BSA, para no añadir más bloqueo durante la incubación.
    Y simplemente por comprobar que los reactivos usados están en perfecto estado, es aconsejable verificar que el sustrato enzimático no se ha degradado y da la señal esperada.
    Os propongo que probéis estas variaciones en el protocolo y en caso de seguir sin obtener el resultado esperado me volváis a contactar. Si el anticuerpo resultara haber salido defectuoso, al estar en garantía, os mandaríamos un vial nuevo gratuito o un reembolso en compensación.
    Así pues, os deseo mucha suerte, y espero vuestra respuesta.

    Read More
    Application
    Immunocytochemistry/ Immunofluorescence
    Sample
    Human Cell (HeLa)
    Specification
    HeLa
    Fixative
    Paraformaldehyde
    Permeabilization
    Yes - 0.5% Triton X100

    Dr. Kirk Mcmanus

    Verified customer

    Submitted Oct 19 2010

    Please note: All products are "FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES"
    For licensing inquiries, please contact partnerships@abcam.com

    Sign up