Anti-PRDM16 antibody (ab85874)

Rabbit polyclonal PRDM16 antibody. Validated in WB and tested in Human. Immunogen corresponding to synthetic peptide.

Overview

  • Product name

  • Description

    Rabbit polyclonal to PRDM16
  • Host species

    Rabbit
  • Tested applications

    Suitable for: WBmore details
  • Species reactivity

    Reacts with: Human
  • Immunogen

    Synthetic peptide corresponding to Human PRDM16 aa 1250 to the C-terminus (C terminal) conjugated to keyhole limpet haemocyanin.
    (Peptide available as ab95842)

  • Positive control

    • This antibody gave a positive signal in the following whole cell lysates: HeLa; Jurkat; HEK293.

Properties

Applications

Our Abpromise guarantee covers the use of ab85874 in the following tested applications.

The application notes include recommended starting dilutions; optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

Application Abreviews Notes
WB Use a concentration of 1 µg/ml. Detects a band of approximately 150 kDa (predicted molecular weight: 140 kDa).

Target

  • Function

    Binds DNA and functions as a transcriptional regulator. Functions in the differentiation of brown adipose tissue (BAT) which is specialized in dissipating chemical energy in the form of heat in response to cold or excess feeding while white adipose tissue (WAT) is specialized in the storage of excess energy and the control of systemic metabolism. Together with CEBPB, regulates the differentiation of myoblastic precursors into brown adipose cells. Functions also as a repressor of TGF-beta signaling. Isoform 4 may regulate granulocytes differentiation.
  • Tissue specificity

    Expressed in uterus and kidney.
  • Involvement in disease

    Note=A chromosomal aberration involving PRDM16 is found in myelodysplastic syndrome (MDS) and acute myeloid leukemia (AML). Reciprocal translocation t(1;3)(p36;q21). Isoform 4 is specifically expressed in adult T-cell leukemia.
  • Sequence similarities

    Contains 10 C2H2-type zinc fingers.
    Contains 1 SET domain.
  • Cellular localization

    Nucleus.
  • Information by UniProt
  • Database links

  • Alternative names

    • CMD1LL antibody
    • KIAA1675 antibody
    • LVNC8 antibody
    • MDS1/EVI1 like gene 1 antibody
    • MDS1/EVI1-like gene 1 antibody
    • MEL1 antibody
    • PFM 13 antibody
    • PFM13 antibody
    • PR domain containing 16 antibody
    • PR domain containing protein 16 antibody
    • PR domain zinc finger protein 16 antibody
    • PR domain-containing protein 16 antibody
    • PRD16_HUMAN antibody
    • Prdm16 antibody
    • Transcription factor MEL 1 antibody
    • Transcription factor MEL1 antibody
    see all

Images

  • All lanes : Anti-PRDM16 antibody (ab85874) at 1 µg/ml

    Lane 1 : HeLa (Human epithelial carcinoma cell line) Whole Cell Lysate
    Lane 2 : Jurkat (Human T cell lymphoblast-like cell line) Whole Cell Lysate
    Lane 3 : HEK293 (Human embryonic kidney cell line) Whole Cell Lysate

    Lysates/proteins at 10 µg/ml per lane.

    Secondary
    All lanes : Goat polyclonal to Rabbit IgG - H&L - Pre-Adsorbed (HRP) at 1/3000 dilution

    Developed using the ECL technique.

    Performed under reducing conditions.

    Predicted band size: 140 kDa
    Observed band size: 150 kDa
    why is the actual band size different from the predicted?


    Exposure time: 12 minutes

References

ab85874 has not yet been referenced specifically in any publications.

Customer reviews and Q&As

1-2 of 2 Abreviews or Q&A

Question

1) Code du produit Abcam : ab85874
2) Numéro de commande Abcam ou le numéro de lot/batch : *******
3) Description du problème : observation d’une bande à la taille attendue dans une seule condition alors qu’on devrait la voire dans 2 conditions.
Besoin de s’assurer que la bande que l’on voit est bien la protéine PRDM16, besoin d’un contrôle positif.
4) Préparation de l’échantillon :
Type d’échantillon (lysat cellulaire, fraction, protéine recombinante …) :lysat cellulaire
Tampon de lyse : triple detergent lysis buffer
Inhibiteurs de protéases :Protéase inhibitor Cocktail for mammalian tissues de chez roche ref :P8340, PMSF et aprotine
Inhibiteurs de phosphatases
Agent réductant bleu NuPAGE LDS sample buffer 4X et NuPAGE Sample reducing Agent 10X
95oC pendant ≥5 min? non : 10min à 70°c

Protéine/puits en mg ou nombre de cellules/puits :30
Contrôle positif :inexistant
Contrôle négatif : inexistant

5) Pourcentage du gel :6%
Type de membrane :nitrocellulose
Vérification du transfert :ponceau
Tampon de saturation et concentration :PBS 0,1%tween 5% lait
Temps d’incubation de la saturation :1heure
Température de saturation : RT
6) Anticorps primaire (utilisation de plusieurs anticorps, description dans “notes supplémentaires”) :
Concentration ou dilution :1microgr/ml
Tampon diluant PBS 0,1%tween 5% lait
Temps d’incubation :ON
Température Incubation :4°c
7) Anticorps secondaire :
Espèce :donkey
Réagit contre : rabbit
Concentration ou dilution 1/2000
Tampon de dilution :PBS 0,1%tween 5% lait
Temps d’incubation : 45 min
Température d’incubation :RT
Fluorochrome or enzyme conjuguée

8) Lavage après les anticorps primaire et secondaire :
Tampon PBS tween 0,1%
Nombre de lavage :4
Temps d’incubation du lavage :5 min
9) Méthode de détection :HRP conjugated antibody (ECl+)
10) Combien de fois avez vous essayer ce Western Blot ?4
Obtenez-vous toujours le même résultat ? oui
Quelle étape avez vous optimisée ? la lyse des cellules et la concentration des AC.

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Answer

Merci d'avoir pris le temps de remplir notre questionnaire et de nous avoir contactés.

Notre politique est d'offrir tout d'abord la meilleure assistance technique. Si nous concluons que le produit que vous avez reçu ne fonctionne pas comme mentionné sur sa fiche technique et que ce produit a été commandé sous 6 mois, nous nous ferons un plaisir de vous offrir un remplacement gratuit ou un avoir en compensation.

J'aimerais donc vous offrir quelques suggestions afin d'optimiser vos résultats. J'apprécierais si vous pouviez confirmer quelques détails de la procédure.

1) Comme indiqué sur la fiche technique,HEK293 a été utilisé comme controle poisitif pour l'expression de PRDM16. Il est donc possible d'obtenir un signal pour les lysats de cette lignée cellulaire. Qu'en pensez-vous?

2) Afin de mieux distinguer l'intensité du signal d'un échantillon à l'autre, je recommanderais d'utiliser comme agent bloquant de la BSA à 5%. Dans la plupart des cas la BSA permet d'obtenir un signal spécifique plus intense et moins de bruit de fond.

J'espère que ces informations vous aideront. Si nos suggestions ne permettent pas d'améliorer vos résultats, n'hésitez pas à me recontacter pour plus d'assistance.

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Question
Answer

Je suis désolée d'apprendre que ab85874 ne vous donne pas de bons résultats en Western blot.

Comme discuté au téléphne, veuillez trouver ci-joint un questionnaire qui nous permet de regrouper le plus d'informations possible sur le protocole que vous avez utilisé avec cet anticorps. Celui-ci nous permettra de vous fournir la meilleure assistance technique.

Si nous concluons que notre produit est fautif et ne fonctionne pas comme explicité par notre fiche technique, nous serons ravis de mettre en place l'envoi d'un tube de remplacement gratuit ou d'un remboursement (sous réserve d'une commande ultérieure de 180 jours).

Je vous remercie par avance de nous envoyer votre protocole.

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Please note: All products are "FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES"
For licensing inquiries, please contact partnerships@abcam.com

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