Anti-Twist antibody (ab50581)

Vielen Dank für Ihre Antwort.

Ich werde Ihnen gerne nun die drei Ersatzröhrchen senden. Soll ich diese an die Warenannahme senden oder wollen Sie mir Ihre direkte Adresse senden? Ich brauche auch eine Telefonnummer für den Lieferanten, falls niemand da ist um die Ware entgegenzunehmen.

Ich schlage vor, Ihnen vorerst ein Röhrchen der neuen Charge zu senden. Falls dieses dann funktioniert, kann ich Ihnen gleich die anderen zwei Röhrchen derselben Charge senden. Lassen Sie mich wissen, ob Sie hiermit einverstanden sind.

Ich freue mich wieder von Ihnen zu hören.

Vielen Dank für das Senden des ausgefüllten Fragebogens.

Leider sind mir ein paar Punkte noch nicht klar. Da es sich um drei Röhrchen handelt, möchte ich auch sicher gehen, dass wir nichts übersehen. Ich bitte Sie daher, noch die folgenden Fragen zu beantworten:

1.) Können Sie bestätigen, dass Twist in den ENT Tumoren vorhanden ist, welche Sie benutzt haben? Wieviele verschiede Tumore haben Sie getestet?

2.) Können Sie mir bestätigen, um welche Charge es sich handelt? xx. Bitte senden Sie uns auch die Bestellnummer oder das Datum der Bestellung (mit Namen der Person diedie Bestellung aufgegeben hat) der drei Röhrchen von ab50581.

3.) Was für einen Puffer haben Sie zur HIER benutzt?

4.) Wie haben Sie die Röhrchen gelagert nach der Ankunft bei Ihnen? Wurden Sie aliquotiert?

Ich habe auch in unserem System geschaut, ob es Hinweise geben könnte auf eine fehlerhafte Charge. Ich habe nichts in diesem Sinne gefunden. Ich werde dies jedoch weiter verfolgen. Wie schon gesagt, garantieren wir alle unsere Produkte. Falls wir also die Ursache nicht herausfinden können, werden wir Ihnen die Röhrchen ersetzen.

Vielen Dank für Ihre Kooperation. Ich freue mich wieder von Ihnen zu hören.

Vielen Dank für Ihren Anruf.

Es tut mir leid zu hören, dass Sie Probleme mit dem neuen Lot von diesemAntikörper haben.

Ich habe den besprochenenFragebogen als Word-Dokument an diese E-Mail angehängt. Ich bin Ihnen dankbar, wenn Sie sich die Zeit nehmen könnten, diesen auszufüllen. Bitte notieren Sie auch alle Lot-Nummern (inkl. diese welche funktioniert hatten) und Bestellnummern.

Falls Sie mir Ihre genau Lieferadresse mit Telefonnummer auch senden, kann ich dann den Versand eines neuen Röhrchens des anderen Lots an Sie organisieren.

Vielen Dank für Ihre Kooperation. Ich freue mich, bald wieder von Ihnen zu hören.

Thank you for providing the image.

unfortunately, all expression databases I checked (EST Profile and BioGPS) do not show any expression for twist in liver or fibroblasts.

I therefore strongly recommend to run a positive control with Osteosarcoma MG-63 cells, human melanoma Mel15 cells or tissues where twist is highly expressed, for example kidney.

Other users used A293T cells andC6 mouse glioma cell successfully.

Thank tyou for your cooperation. I hope the positive control help improve the results form this antibody.

Thank you for contacting us.

ab50581is ananti-Twist, not anti-BCRP/ABCG2 antibody. Could you please confirm this with your customer?

Unfortunately we do not have a recommended protocol for EMSA.This application was added to the datasheet for ab50581 thanks to the successful use of this product in the following publication : http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3170288/?tool=pubmed

In this article the authors used ab50581 in EMSA as followed :

Nuclear extracts were obtained from 293T cells transfected with pFLAG-TWIST. The specific activity of the [α-32p]-labeled probes used in the assays was adjusted to 104 CPM/1.25 pmole DNA. The probe was incubated at 25°C for 30 min with 5 µg of nuclear extract in a buffer consisting of 10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 50 mM KCl, 5 mM dithiothreitol, 10% glycerol, 1 µg poly dI/dC), bromophenol blue/50% glycerol in a total volume of 20 µl. Samples were loaded on 5% polyacrylamide gels and run at 150 V for 2 h in 1× TBE buffer. The gels were dried and exposed to x-ray film. All unlabeled competitor oligonucleotides were added before incubation with labeled oligonucleotides. For supershift assay, anti-human TWIST polyclonal antibody (1 µg) (Abcam, ab50581) was added at 4°C for 1 day before the addition of labeled oligonucleotides. Densitometric analysis of the DNA-protein complexes was performed on the captured images using the typhoon 8600 and ImageMaster VDS software (Amersham Biosciences).

I am sorry this product did not perform as stated on the datasheet and for the inconvenience this has caused. As requested, I have issued a free of charge replacement for one vial of ab50581. To check the status of the order please contact our Customer Service team and reference this number. Please note that this free of charge replacement vial is also covered by our Abpromise guarantee. Should you still be experiencing difficulties, or if you have any further questions, please do not hesitate to let us know. I wish you the best of luck with your research.